第一篇:微生物学第九章
一. 名词解释
1.体液免役: 指机体受抗原刺激后,来源于骨髓的一类小淋巴细胞进行增殖并分化
为浆细胞,由它合成抗体并释放到体液中以发挥其免疫作用。
2.细胞免役: 机体在抗原刺激下, 一类小淋巴细胞发生增殖, 分化, 进而直接攻击
靶细胞或间接地释放一些淋巴因子的免疫作用.
3. 抗原决定簇又称抗原表位,指位于抗原表面可决定抗原特异性的特定化学基团。
4.组织相容性是指在不同高等动物个体间进行组织或器官移植时,供体与受体双方彼此可接受的程度。
5.抗原抗原是一类能诱导机体发生免疫应答并能与相应的抗体或t淋巴细胞受
体发生特异性免疫反应的大分子物质。
6非特异性免疫 :是机体的一般生理防卫功能,又称天然免疫,它是在种系发育过
程中形成的,由先天遗传而来,是防卫任何外界异物对机体的侵入而不需要特殊的刺激或诱导.
7特异性免疫 :是机体生命过程中接受抗原性异物刺激后获得的免疫称为特异性免疫,又称获得性免疫,具有获得性、高度特异性和记忆性。
8菌苗与疫苗 : 菌苗是指用细菌制成的生物制品。疫苗是指用病毒、立克次氏体或螺旋体等微生物制成的生物制品。
9表面抗原:指包围在细菌细胞壁外层的抗原,主要是荚膜或微荚膜抗原。10 疫苗vaccine
二.填空
1.一个微生物个体一的抗原成分相当复杂,它是由许多不同抗原组成的复合抗原,以细
菌为例其他抗原包括:菌体抗原,鞭毛抗原,表面抗原,菌毛抗原
2.主要的抗原抗体反应有:凝集反应,沉淀反应和免疫反应
三.选择
1.下述细胞中能够产生抗体的是:(b)
at细胞bb细胞cnk细胞d 巨噬细胞
2.下述细胞中不属于特异性免疫细胞是:(c)
at细胞bb细胞cnk细胞d 抗原提呈细胞
四.问答
1. 细菌的抗原种类有那些。
i. 表面抗原, 如荚膜抗原;
ii. 菌体抗原, 如o抗原;
iii. 鞭毛抗原, 如h抗原;
iv. 菌毛抗原,
v. 外毒素抗原和内毒素抗原
第二篇:微生物学实验
细菌群体生长表现为细胞数目的增加或细胞物质的增加。测定细胞数目的方法有显微镜直接计数法(direct microscopic count)、平板菌落计数法(plate count)、光电比油法(turbidity estimation by spectrophotometer)、最大或然数法(most probable number mpn)以及膜过滤法(membrane filtration)等。测定细胞物质的方法有细胞干重的测定,细胞某种成分如氮的含量、rna和dna的含量测定,代谢产物的测定等。总之,测定微生物生长量的方法很多,各有优缺点,工作中应根据具体情况要求加以选择。 本实验主要介绍生产、科研工作中比较常用的显微镜直接计数法、平板菌落计数法和光电比浊计数法。
一 显微镜直接计数法
(一)目的要求
1.明确血细胞计数板计数的原理。
2.掌握使用血细胞计数板进行微生物计数的方法。
(二) 基本原理
显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻片上(又称计菌器),于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。目前国内外常用的计菌器有:血细胞计数板、peteroff-hauser计菌器以及hawksley计菌器等,它们都可用于酵母、细菌、霉菌孢子等悬液的计数,基本原理相同。后两种计菌器由于盖上盖玻片后,总容积为0.02mm3,而且盖玻片和载波片之间的距离只有0.02mm,因此可用油浸物镜对细菌等较小的细胞进行观察和计数。除了用这些计菌器外,还有在显微镜下直接观察涂片面积与视野面积之比的估算法,此法一般用于牛乳的细菌学检查。显微镜直接计数法的优点是直观、快速、操作简单。但此法的缺点是所测得的结果通常是死菌体和活菌体的总和。目前已有一些方法可以克服这一缺点,如结合活菌染色微室培养(短时间)以及加细胞分裂抑制剂等方法来达到只计数活菌体的目的。本实验以血球计数板为例进行显微镜直接计数。另外两种计菌器的使用方法可参看各厂商的说明书。
用血细胞计数板在显微镜下直接计数是一种常用的微生物计数方法。该计数板是一块特制的载玻片,其上由四条槽构成三个平台;中间较宽的平台又被一短横槽隔成两半,每一边的平台上各列有一个方格网,每个方格网共分为九个大方格,中间的大方格即为计数室。血细胞计数板构造如图l5-1。计数室的刻度一般有两种规格,一种是一个大方格分成25个中方格,而每个中方格又分成16个小方格(图15—2);另一种是一个大方格分成16个中方格,而每个中方格又分成25个小方格,但无论是哪一种规格的计数板,每一个大方格中的小方格都是400个。每一个大方格边长为lmm,则每一个大方格的面积为lmm2,盖上盖玻片后,盖玻片与载玻片之间的高度为0.lmm,所以计数室的容积为0.lmm3(万分之一毫升)。
图15—1 血细胞计数板构造(一) 图15—2 血细胞计数板构造(二)
a. 正面图;b.纵切面图; 放大后的方格网,中间大方格为计数室
1.血细胞计数板;2. 盖玻片;3.计数室
计数时,通常数五个中方格的总菌数,然后求得每个中方格的平均值,再乘上25或16,就得出一个大方格中的总菌数,然后再换算成lml菌液中的总菌数。
设五个中方格中的总菌数为a,菌液稀释倍数为b,如果是25个中方格的计数板,则
1ml菌液中的总菌数=a/5×25×104×b=50000a·b(个)
同理,如果是16个中方格的计数板,
1ml菌液中的总菌数=a/5×16×104×b=32014a·b(个)
(三)器材
1.菌种 酿酒酵母
2.仪器或其他用具 血细胞计数板,显微镜,盖玻片,无菌毛细滴管。
(四)操作步骤
l.菌悬液制备
以无菌生理盐水将酿酒酵母制成浓度适当的菌悬液。
2.镜检计数室
在加样前,先对计数板的计数室进行镜检。若有污物,则需清洗,吹干后才能进行计数。
3.加样品
将清洁干燥的血细胞计数板盖上盖玻片,再用无菌的毛细滴管将摇匀的酿酒酵母菌悬液由盖玻片边缘滴一小滴,让菌液沿缝隙靠毛细渗透作用自动进入计数室,一般 ……此处隐藏8217个字……p>
5、 整个肽聚糖合成过程的步骤很多,反应的部位分别发生在细胞的()、()和(),
因而可分为三阶段。青霉素对细菌的抑制作用发生在()阶段。
6、 细菌产生抗药性的三天途径分别是()、()和()。
7、 获得细菌同步生长的方法主要有()和()两类。
8、 以单链dna为遗传物质的微生物有()等;以单链rna为遗产物质的微生物有()
等。
9、 最常用的固体培养基的凝固剂是()。
10、 染色体内畸变包括()、()、()和()四种类型。
11、 ()是芽孢所特有的化学物质,一般它随着芽孢的形成而形成,随芽孢的萌发
而消失。
12、 目前,可应用在基因工程中来担当外来基因载体的只能是微生物或其某一组分,
它们主要有()和()等。
13、 “人畜共患病”的例子有()、()和()。
14、
15、
16、
17、 列举微生物的次级代谢产物()、()。 例举与微生物有关的共生关系:()、()、()。 注射白喉类毒素可使机体获得()免疫。 e.colik12(入)表示一株带有()的()溶原菌株。
18、 常见的菌种保藏方法有()、()和()等,其中()方法保藏菌种的时间最长
久。
19、 hiv病毒的()特点使得其流行难于控制。
二、名词解释(每个7分,共计35分)
1、 化学耗氧量与生物耗氧量(cod,bod)
2、 完全培养基与基本培养基。
3、 补料分批培养与连续培养。
4、 类病毒与病毒
5、 包含体与伴孢晶体。
三、问答题(共计72分);
1、 叙述质粒的特点、类型、用途(10分);
2、 简述营养物质进入微生物细胞的几种方式和特点。(10分)
3、 什么是化能自养型,举例说明。(10分)
4、 高氏一号培养基成分如下:
可溶性淀粉,kno3,nacl,k2hpo3,mgso4,feso4,琼脂,水请回答下列问题a)这种培养基用于培养哪类微生物?b)分别指出淀粉、琼脂、水和无机盐的作用。(12分)
5、 何谓分解代谢物阻遏?在含乳糖和葡萄糖的培养基中,e.coli生长周期中会出现什
么现象?请从操纵子模型来解释这现象。(15分)
6、 当前新型疫苗有哪些种类?简述1—2种的主要技术内容(15分)
2014年微生物学
一填空题(40分,每空1分)
1 、l型细菌与支原体的共同特点是两者都()
2、青霉素作用于细菌的(),主要对革兰氏()性菌有效。
3、亚病毒包括()、()和()。
4、巴氏消毒法可用于(),干热灭菌法可用于()。
5、常用于保藏产孢子微生物的菌种保藏方法是()。
6、酵母菌的有性孢子是();根霉的有性孢子是()。
7、测定微生物生长,对以下微生物采用何种方法较好:细菌用();酵母菌用();丝状真菌用()。
8、工业发酵中,经emp途径的发酵产品有()和()。
9、实验室常用的有机氮源有()和()等,无机氮源有()等。为节约成本,工厂中常用()等作为有机氮源。
10、列举病毒的两种特殊核酸类型()、()。
11、()是芽孢所持有的化学物质。一般它随着芽孢的形成而形成,随芽孢萌发而消失。
12、奶牛与其中产生纤维素酶的微生物构成()关系。
13、放线菌是一类介于()和()之间的原核微生物。其菌丝因形态和功能不同可分为()、()和()。
14、目前,可应用在基因中来担当外来基因载体的只能是微生物或其某一组分,它们主要有()和()等。
15、昆虫病毒的推广应用受到限制,其原因是()。
16、杀虫微生物包括()、()和()。
17、江河流经城市前水体中的微生物数量要明显()与流经城市后水体中的数量,其原因是流经城市时会有()的大量进入。
18、woese等将微生物分为()、()、()三域。
二名词解释
1 生物地球化学循环2、β-外毒素3、柯赫准则
4、类毒素与内毒素5、bod与cod6、ld50
三、问答题
1、比较化能异养菌与化能自养菌的代谢特点。(10分)
2、简述营养物质进入微生物细胞的几种方式和特点。(10分)
3、有一培养基如下:
甘露醇,mgso4,k2hpo4,kh2po4,cuso4,nacl,caco3,蒸馏水。试述该培养基的a、碳素来源;b、氮素来源;c、矿质来源。该培养基可用于培养哪种微生物?(10分)
4、叙述细菌、酵母、放线菌、霉菌四种微生物的细胞结构与菌落形态的不同。
5、试述固氮菌固氮的生化机制。(15分)
6、试述我国目前杀虫微生物的应用情况。(15分)
第五篇:微生物学实验基本要求
微生物学实验基本要求及成绩评定
一、思想和态度要求
1、树立严谨认真的科学态度
2、理解与验证基本原理
3、掌握并不断提高分析和解决问题的方法
4、启迪创新思维
二、具体要求
1、实验前5-10分钟到达实验室。迟到1次扣除0.5分,无故一次不到扣除1分。
2、每次实验前预习实验的目的、原理和方法,做到心中有数。
3、实验前洗手,保持试验台清洁,保持室内安静。
4、实验过程中要严格无菌操作、防止杂菌污染。
5、实验过程中,严格按正确方法操作实验仪器。
6、实验过程中认真及时做好实验记录。
7、实验过程中,切勿使乙醇、乙醚、丙酮等易燃品接近火焰。如遇火险,先关掉火源,再用湿布掩灭,必要时用灭火器。
8、每次实验完成后,清洁试验台,各种物品放回原位。
9、带菌材料的处理:含菌培养基应灭菌后再作为垃圾处理。
10、由于操作不当损坏玻璃器皿,先登记姓名,并扣分,每件1分。
11、认真按要求完成实验报告。
三、微生物学实验成绩评定
1、基础和综合实验80%
每次实验5分,其中实验操作3分,实验报告2分
2、实验考试10%
实验理论和实验操作各为5分
3、自主设计实验10%
包括实验设计、实验操作、实验结果、汇报交流,共10分